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摘 要:本文研究以根結(jié)線蟲天敵真菌1分離物為材料,提取純化得到DFRKN1堿性磷酸酶,并采用化學(xué)修飾的方法對(duì)酶的必需功能團(tuán)進(jìn)行定性分析,確定色氨酸殘基、組氨酸殘基、賴氨酸殘基為酶的活性中心的必需功能團(tuán),在此基礎(chǔ)上,對(duì)DFRKN1堿性磷酸酶的必需功能團(tuán)進(jìn)行定量研究。分別用不同濃度N溴代琥珀酰亞胺修飾酶蛋白的色氨酸殘基,溴乙酸修飾酶蛋白的組氨酸殘基的咪唑基,甲醛修飾酶蛋白的賴氨酸殘基,測(cè)定酶活性計(jì)算反應(yīng)速度常數(shù),以反應(yīng)速度常數(shù)的變動(dòng)來確定必需基團(tuán)的數(shù)目,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:酶活性中心必需功能團(tuán)色氨酸殘基、組氨酸殘基、賴氨酸殘基的數(shù)目均為一個(gè)。(剩余3925字)
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DFRKN 1堿性磷酸酶功能團(tuán)的定量分析
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