海南雷公筍的SCoT-PCR體系優(yōu)化及有效引物篩選

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摘要 ［目的］分析DNA、引物，dNTPs、Taq DNA聚合酶4種因素對(duì)雷公筍SCoT-PCR擴(kuò)增結(jié)果的影響，通過最優(yōu)的SCoT-PCR反應(yīng)體系篩選多態(tài)性引物，為雷公筍種質(zhì)資源分子標(biāo)記研究提供條件。［方法］以海南雷公筍為材料，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)方法。［結(jié)果］Taq酶對(duì)雷公筍SCoT-PCR擴(kuò)增的影響最大，其次是模板DNA和dNTPs，最后是引物；最優(yōu)反應(yīng)體系為20 μL體系中40 ng DNA，0.30 μmol/L 引物，0.25 mmol/L dNTPs，3.00 U Taq酶。（剩余10162字）