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檉柳再生和轉(zhuǎn)化體系的建立及瞬時轉(zhuǎn)化TcSYP121基因功能分析

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摘要:【目的】建立檉柳再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系并分析瞬時轉(zhuǎn)化柳樹突觸融合蛋白(TcSYP121)基因功能,為篩選檉 柳分子抗性育種候選基因及鹽堿土的改良和生態(tài)修復提供理論參考?!痉椒ā客ㄟ^單因素篩選最佳外植體、消毒處理、 各階段(初代、分化、增殖和生根)的培養(yǎng)基類型及激素濃度建立檉柳再生體系;通過正交試驗分析影響轉(zhuǎn)化體系的4 個因素(預培養(yǎng)時間、侵染時間、共培養(yǎng)時間和農(nóng)桿菌濃度);通過PCR擴增及電泳結(jié)果驗證檉柳轉(zhuǎn)化體系;瞬時轉(zhuǎn)化TcSYP121基因獲得過表達植株(OE)和病毒誘導的基因沉默植株(VI),進行表型觀測、植物超氧陰離子染色液(NBT)和二氨基聯(lián)苯胺法(DAB)染色并測定鹽腺直徑和鹽腺密度、葉綠素含量、超氧化物酶(SOD)活性、過氧化物酶(POD)活性及TcSYP12l基因相對表達量,分析TcSYP121基因的功能。(剩余22675字)

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