豬流行性腹瀉病毒微滴式數(shù)字PCR定量檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用

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摘 要： 旨在建立一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）微滴式數(shù)字PCR（droplet digital PCR， ddPCR）定量檢測(cè)方法。本研究根據(jù)GenBank登錄的PEDV（MK862249.1）M基因序列保守區(qū)設(shè)計(jì)合成特異性引物對(duì)和探針；通過(guò)對(duì)反應(yīng)體系和反應(yīng)條件的優(yōu)化，成功建立了可用于檢測(cè)PEDV的熒光定量PCR（fluorescent quantitative real-time PCR，F(xiàn)Q-PCR）方法，將自行建立的FQ-PCR方法的引物對(duì)/探針用來(lái)確定ddPCR 方法；對(duì)ddPCR方法進(jìn)行敏感性、特異性、重復(fù)性和初步應(yīng)用試驗(yàn)。（剩余12119字）