豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5蛋白納米抗體的篩選及其對病毒復制的抑制效應

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摘 要： 為獲得豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）GP5蛋白的特異性納米抗體，并探究其對病毒復制的抑制效應。使用原核表達系統(tǒng)將PRRSV-GP5蛋白大量表達后經(jīng)鎳柱親和層析法純化，使用所獲的重組GP5蛋白免疫羊駝，并于第0、14、28、42 天時采血，檢測羊駝體內(nèi)抗體效價后分離全血淋巴細胞，提取細胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄后使用巢式PCR擴增出重鏈抗體可變區(qū)（VHH）片段，并與pCANTAB-5E載體相連后轉(zhuǎn)化入TG1感受態(tài)細胞，利用噬菌體展示技術(shù)構(gòu)建GP5-VHH噬菌體抗體展示文庫。（剩余19065字）