L-半胱氨酸對(duì)綿羊卵巢顆粒細(xì)胞增殖、凋亡和類固醇激素分泌的影響

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摘 要： 旨在探討L -半胱氨酸（L-Cys）對(duì)體外培養(yǎng)綿羊卵巢顆粒細(xì)胞（GCs）增殖、凋亡和類固醇分泌的影響。本研究采集1～1.5歲齡體重相近飼養(yǎng)條件相同的30只健康性成熟小尾寒羊母羊新鮮卵巢，從優(yōu)勢(shì)卵泡（2～8 mm）中收集GCs，隨機(jī)分為 5 組，每組 6 個(gè)重復(fù)，各組添加L-Cys 濃度分別為0、100、300、500和700 μmol·L-1，培養(yǎng)48 h 后用CCK-8試劑盒進(jìn)行細(xì)胞增殖活力測(cè)定，Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞儀檢測(cè)GCs的凋亡情況，采用 ELISA 檢測(cè)GCs培養(yǎng)液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和 Western blot 分析L-Cys對(duì)綿羊顆粒細(xì)胞增殖相關(guān)基因（PCNA、CCND2、CCNB1）、凋亡相關(guān)基因（BAX、Caspase-3、Bcl-2）和類固醇分泌相關(guān)基因的（STAR、3β-HSD、CYP11A1、CYP19A1）mRNA和蛋白表達(dá)的影響。（剩余18443字）