多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)檢測食源性致病菌

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摘要：基于多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（MLPA），建立了一種能夠同時(shí)檢測食品中11種常見食源性致病菌的方法。通過設(shè)計(jì)并合成特異性MLPA探針，與高溫變性后的標(biāo)準(zhǔn)菌株DNA進(jìn)行雜交、連接、PCR擴(kuò)增反應(yīng)，利用毛細(xì)管電泳法分析PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。結(jié)果表明，利用11對探針分別對單一致病菌核酸樣品進(jìn)行檢測，每種待測物均為單一峰，未出現(xiàn)雜峰，說明11對探針之間不存在交叉影響，探針特異性良好；利用11對探針同時(shí)對混合致病菌核酸樣品進(jìn)行多重檢測，每種待測物均可得到與預(yù)期大小一致的擴(kuò)增峰，擴(kuò)增峰之間互不干擾，空白對照中沒有擴(kuò)增出任何目的擴(kuò)增峰，說明該體系能同時(shí)檢測多種食源性致病菌。（剩余12662字）