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活性口袋關(guān)鍵色氨酸對(duì)幾丁質(zhì)酶Chi304 催化性質(zhì)的研究

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摘要:幾丁質(zhì)酶中存在結(jié)合口袋及水解活性位點(diǎn),關(guān)鍵氨基酸與底物幾丁質(zhì)的結(jié)合可調(diào)控酶的水解活性。以嗜熱幾丁質(zhì)酶Chi304為研究材料,采用同源建模分析其高級(jí)結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)在其底物結(jié)合口袋附近存在2個(gè)色氨酸(W140與W272),將其定點(diǎn)突變?yōu)楸彼岷?,采用高效液相色譜檢測(cè)酶的水解產(chǎn)物,并進(jìn)一步分析水解產(chǎn)物三乙酰殼三糖(DP3)與二乙酰殼二糖(DP2)的比例(DP3/DP2),用于評(píng)估突變體的效果。(剩余14169字)

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