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相思子堿通過P53/mTOR通路緩解脂多糖對水牛乳腺上皮細(xì)胞β-酪蛋白合成的影響

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摘要:【目的】探究相思子堿(Abrine)通過調(diào)節(jié)P53/mTOR通路緩解脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)對水牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白合成的影響,為緩解乳房炎引起的水牛乳品質(zhì)下降提供理論依據(jù)。【方法】使用脂多糖構(gòu)建水牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥模型,同時(shí)使用相思子堿、P53抑制劑(Pifithrin-μ)、P53激活劑(Kevetrin hydrochloride)與水牛乳腺上皮細(xì)胞共同孵育12 h;通過HE染色觀察水牛乳腺組織形態(tài),采用CCK-8法檢測細(xì)胞活性,使用ELISA試劑盒檢測水牛乳腺上皮細(xì)胞β-酪蛋白分泌水平,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測定NF-κB、IL-1β、TNFα、β-casein、mTOR、P53、JAK2、STAT5和AKT1基因相對表達(dá)量,并以Western blotting檢測NF-κB、IL-1β、TNFα、β-casein、mTOR和P53蛋白相對表達(dá)量。(剩余22937字)

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