白細胞介素22對肝星狀細胞活化的影響及其機制

打開文本圖片集

摘要：目的探討肝星狀細胞活化過程中白細胞介素（IL）22發(fā)揮的作用及影響機制。方法選取人肝星狀細胞系LX-2細胞為研究對象，以轉化生長因子（TGF）β1誘導LX-2細胞構建肝星狀細胞活化模型，以梯度濃度的IL-22處理LX-2細胞，通過Western Blot、qRT-PCR檢測活化標志物Ⅰ型膠原蛋白（COL1A1）、α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）表達水平以確定適宜的藥物工作濃度、時間；通過Western Blot、qRT-PCR及免疫熒光方法檢測經IL-22處理的活化肝星狀細胞中成纖維細胞因子誘導早期反應蛋白14（Fn14）、內質網應激（ERS）及其活化標志物水平；以衣霉素（TM）誘導LX-2細胞ERS，通過Western Blot、qRT-PCR檢測經IL-22處理后LX-2細胞ERS及其活化標志物水平；使用腫瘤壞死因子樣細胞凋亡弱誘導劑（TWEAK）、小干擾RNA分別上/下調Fn14，再檢測磷酸化肌醇需求蛋白1α（p-IRE1α）、肌醇需求蛋白1α（IRE1α）、轉錄因子剪接型X-盒結合蛋白1（XBP1s）、COL1A1和α-SMA基因及蛋白水平；在IL-22處理TGF-β1誘導的LX-2細胞的基礎上加用TWEAK上調Fn14，通過Western Blot、免疫熒光方法檢測Fn14、ERS及其活化標志物水平。（剩余16885字）