瑤山亞種樹鼩IFN-β和IFN-γ原核表達(dá)及其多克隆抗體制備

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摘要：【目的】構(gòu)建瑤山亞種樹鼩IFN-β和IFN-γ基因原核表達(dá)載體，并制備IFN-β和IFN-γ多克隆抗體，為進(jìn)一步研究樹鼩病毒感染動(dòng)物模型打下基礎(chǔ)?！痉椒ā恳袁幧絹喎N樹鼩外周淋巴細(xì)胞為原材料，提取總RNA后經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增瑤山亞種樹鼩IFN-β和IFN-γ基因，亞克隆至質(zhì)粒pcDNA3.1（+）上構(gòu)建真核表達(dá)載體，并瞬時(shí)轉(zhuǎn)染倉(cāng)鼠腎細(xì)胞（BHK-21）;同時(shí)亞克隆到原核載體pET-28a（+）上構(gòu)建原核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21（DE3）感受態(tài)細(xì)胞后以IPTG誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白IFN-β和IFN-γ。（剩余22572字）