蘆筍SSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化及驗證

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摘    要：以蘆筍幼葉為材料，采用單因素與L16（43）正交試驗相結(jié)合的方法，對影響蘆筍SSR-PCR反應(yīng)的3個因素（2×Taq Master Mix，模板DNA，引物）進行優(yōu)化，并以此為基礎(chǔ)通過退火溫度和循環(huán)次數(shù)試驗篩選引物最佳退火溫度和循環(huán)次數(shù)。結(jié)果表明，蘆筍基因組DNA的SSR-PCR最優(yōu)反應(yīng)體系為：10 μL反應(yīng)體系中，50 ng·μL-1 DNA模板0.125 μL，10 μmol·L-1 上下游引物各0.5 μL，2×Taq PCR Mix 3 μL，滅菌ddH2O 5.875 μL。（剩余10853字）