抗犬瘟熱病毒犬源化嵌合單鏈抗體scFv-Fc的制備與活性分析

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摘  要： 為減少和改善鼠源單克隆抗體在犬臨床治療中的異源性和功效，用RT-PCR方法從分泌抗犬瘟熱病毒（CDV）中和單克隆抗體的鼠源雜交瘤細(xì)胞中擴(kuò)增抗體重鏈可變區(qū)（VH）和輕鏈可變區(qū)（VL），通過(guò)Linker將VH和VL連接獲得單鏈抗體（scFv）基因，選擇犬源抗體IgG B恒定區(qū)（Fc）連接到scFv的C末端獲得犬源化嵌合單鏈抗體（scFv-Fc）基因；分別構(gòu)建鼠源scFv與犬源化scFv-Fc的原核表達(dá)載體，通過(guò)大腸桿菌表達(dá)、純化，用ELISA、IPMA、細(xì)胞融合抑制和中和試驗(yàn)檢測(cè)表達(dá)抗體的特異性和中和活性。（剩余20174字）