Tollip敲除豬腎細胞系的構建
打開文本圖片集
摘 要:旨在探究Toll作用蛋白(toll-interacting protein,Tollip)對口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,F(xiàn)MDV)增殖的影響,利用CRISPR/Cas9基因編輯技術構建Tollip基因缺失的豬腎細胞系(porcine kidney cell line,PK-15),并通過PCR測序和Western blot確認敲除效果,然后利用CCK-8試劑盒測定Tollip缺失后細胞活力變化,確認敲除細胞與野生細胞無顯著差異,用FMDV感染敲除細胞后,采用Western blot、間接免疫熒光、實時熒光定量和病毒滴度測定等方法測定病毒在敲除細胞系中復制情況。(剩余16575字)