Neuritin野生型蛋白的制備及活性、穩(wěn)定性的檢測及分析

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摘要：目的 制備符合藥典結(jié)構(gòu)要求的無標簽Neuritin野生型（wild type，WT）蛋白，并完成其存在形式、活性及穩(wěn)定性鑒定及分析。方法 利用基因重組技術(shù)構(gòu)建符合藥典結(jié)構(gòu)要求的Neuritin WT酵母重組子，利用SDS-PAGE還原電泳及Western blot對其進行高表達篩選及鑒定；摸索建立無標簽Neuritin WT蛋白純化方法，對純化后的蛋白進行SDS-PAGE還原電泳分子量鑒定、Western blot免疫原性鑒定、SEC-HPLC精細鑒定及宿主DNA、宿主蛋白殘留量檢測；利用SDS-PAGE非還原電泳完成存在形式的鑒定；通過參照藥典建立的重組Neuritin蛋白活性鑒定方法，檢測并分析Neuritin WT純化蛋白的活性，并觀察37℃下不同時間Neuritin WT純化蛋白的穩(wěn)定性。（剩余14682字）