前導肽介導的SprD 蛋白體外折疊研究

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摘要：為提高以前體形式合成的蛋白質折疊與成熟效率，以枯草桿菌蛋白酶SprD為研究對象，通過蛋白重組表達、氨基酸定點突變、包涵體純化結合體外復性、酶催化性能測定等方法比較各前體蛋白折疊成熟情況。結果表明，野生型前導肽介導的SprD前體蛋白可以在230 min內完成成熟，時間較長；成熟肽序列中E112A、S221A及S221C等突變導致相應前體蛋白成熟時間延長或成熟失??；而前導肽串聯(lián)表達和切割位點酪氨酸缺失等措施可以將蛋白成熟時間縮短至80～160 min，成熟效率提高0.5～2.0倍，且成熟酶催化能力不受影響。（剩余12262字）