非洲豬瘟病毒B646L和F778R雙基因PCR檢測(cè)方法的構(gòu)建

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摘 要：為建立一種能夠快速檢測(cè)非洲豬瘟病毒（ASFV）的普通PCR方法，本研究分別以ASFV B646L和F778R基因?yàn)榘行蛄性O(shè)計(jì)了兩對(duì)特異性引物，建立ASFV B646L和F778R雙基因普通PCR方法，并對(duì)其特異性、靈敏性及重復(fù)性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示：該P(yáng)CR體系（25.0 μL體系）的最優(yōu)組合為Pfu酶0.2 μL、10×Reaction Buffer 2.5 μL、2.5 mmol/L dNTP Mixture 2.5 μL、B646L上下游引物各1.5 μL、F778R上下游引物各0.5 μL、DNA模板1.0 μL；退火溫度為57℃、退火時(shí)間為30 s、72℃延伸2.5 min，30個(gè)循環(huán)。（剩余11981字）