豬催乳素的真核表達(dá)與生物活性驗證

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摘要： 【目的】催乳素（Prolactin，PRL） 具有廣泛的生理調(diào)節(jié)作用，但其多效性機(jī)制仍不清楚。為了更好地研究豬PRL 的多效性，本研究制備豬源PRL 真核重組蛋白并驗證其生物活性。【方法】利用分子克隆技術(shù)將豬PRL 基因克隆到慢病毒表達(dá)載體pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro 中，經(jīng)慢病毒包裝獲得攜帶豬PRL 基因的PRL?慢病毒；用濃縮的PRL?慢病毒感染CHO-K1 細(xì)胞，經(jīng)嘌呤霉素篩選后，獲得能夠分泌PRL 重組蛋白的陽性細(xì)胞系CHO-K1-PRL；利用鎳柱親和層析法對重組蛋白進(jìn)行純化并進(jìn)行LC-MS/MS 質(zhì)譜鑒定，利用HC11 細(xì)胞體外培養(yǎng)體系驗證PRL 重組蛋白的生物活性。（剩余15879字）