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大腸桿菌ESBLs基因克隆表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定

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摘要:大腸桿菌是一種最常見的革蘭氏陰性菌,是一種常見的條件性致病菌。由于在治療大腸桿菌時抗生素的大量使用,使大腸桿菌產(chǎn)生了很多耐藥基因,其中超廣譜β -內(nèi)酰胺酶對許多p-內(nèi)酰胺類抗生素具有耐藥性,且以其中的CTX-M型為主,為了更好地研究產(chǎn)超廣譜β -內(nèi)酰胺酶,本次實(shí)驗(yàn)通過設(shè)計并擴(kuò)增產(chǎn)超廣譜p-內(nèi)酰胺酶的CTX-M-3基因,并通過Ndel、XhoI兩種限制性內(nèi)切酶酶切并連接,預(yù)計構(gòu)建pET42b-ESBLs的原核表達(dá)載體,并送往上海生工公司進(jìn)行測序,并對測序結(jié)果的遺傳相似性及遺傳進(jìn)化進(jìn)行分析,由于引物的特異性或模板的特殊性,測序結(jié)果顯示擴(kuò)增結(jié)果為DH5a染色體基因組并構(gòu)建的載體是DH5a染色體基因的原核表達(dá)載體。(剩余4881字)

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