谷子糖基轉(zhuǎn)移酶基因SiDDOST的克隆及表達(dá)載體的構(gòu)建

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摘    要：為探究谷子糖基轉(zhuǎn)移酶基因的生物學(xué)功能及調(diào)控作用，以谷子為材料，利用RT-PCR技術(shù)從谷子農(nóng)家品種毛毛亮擴(kuò)增獲得1 338 bp包含完整編碼區(qū)的糖基轉(zhuǎn)移酶基因（SiDDOST）cDNA序列，并通過(guò)生物信息學(xué)方法分析SiDDOST全長(zhǎng)序列的特征，利用限制性?xún)?nèi)切酶NcoⅠ和PmlⅠ，分別將目的基因片段與植物過(guò)表達(dá)載體pCAMBIA3301雙酶切，然后切膠回收基因片段和載體片段，通過(guò)T4 DNA連接酶將糖基轉(zhuǎn)移酶基因片段與過(guò)表達(dá)載體pCAMBIA3301連接，重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α，經(jīng)重組表達(dá)載體與空載體電泳檢測(cè)、菌液PCR、雙酶切分析驗(yàn)證。（剩余10663字）