逍遙散及其拆方對Erastin誘導(dǎo)的LO-2肝細(xì)胞系鐵死亡的影響

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〔摘要〕 目的 探討逍遙散及其拆方對Erastin誘導(dǎo)肝細(xì)胞鐵死亡的影響及機(jī)制。方法 使用鐵死亡誘導(dǎo)劑Erastin誘導(dǎo)肝細(xì)胞LO-2鐵死亡，用逍遙散及各功效拆方（逍遙散去疏肝藥組、逍遙散去健脾藥組、逍遙散去養(yǎng)血藥組）的含藥血清進(jìn)行干預(yù)，陽性對照藥使用鐵死亡抑制劑Ferrostatin-1。通過CCK-8檢測細(xì)胞活力，ELISA法檢測細(xì)胞上清液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase， AST）水平，比色法檢測細(xì)胞中丙二醛（malondialdehyde， MDA）、還原型谷胱甘肽（reduced glutathione， GSH）、Fe2+等含量，熒光酶標(biāo)儀檢測脂質(zhì)過氧化活性氧（reactive oxygen species， ROS），RT-PCR檢測細(xì)胞中谷胱甘肽過氧化物酶4（glutathione peroxidase 4， GPX4）、前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2， PTGS2）、鐵調(diào)素（hepcidin）、膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ferroportin， FPN1）mRNA表達(dá)，Western blot檢測細(xì)胞中骨形態(tài)發(fā)生蛋白6（bone morphogenetic protein 6， BMP6）、鐵調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白（hemojuvelin， HJV）、Smad同源物4（mothers against decapentaplegic homolog 4， SMAD4）蛋白表達(dá)。（剩余15131字）