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摘 要:以8種基因型西瓜為試驗(yàn)材料,通過(guò)統(tǒng)計(jì)不同基因型材料的發(fā)芽率、不定芽誘導(dǎo)率,篩選出再生能力較強(qiáng)的基因型,并以其為材料對(duì)種子播種后培養(yǎng)時(shí)間、外植體造傷方式、菌液濃度、共培養(yǎng)時(shí)間及侵染方式等進(jìn)行優(yōu)化篩選,旨在建立高效的西瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系。結(jié)果表明,在播種2 d時(shí),YL、CYY298、CYY171及CYY137之間的種子發(fā)芽率差異不顯著且均顯著高于其他材料,但在不同濃度GA3誘導(dǎo)下,YL外植體的不定芽誘導(dǎo)率均最高;以YL材料為基礎(chǔ)進(jìn)行體系優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)播種2 d后的種子狀態(tài)最適于侵染;刀片劃傷后的外植體熒光亮度最強(qiáng),熒光率最高達(dá)74.9%;菌液濃度OD600=0.8,共培養(yǎng)時(shí)間為3 d時(shí),外植體分化狀態(tài)最佳且熒光率最高為70.3%;真空負(fù)壓方式可以顯著提高侵染效率,外植體熒光率可達(dá)71.8%,愈傷組織誘導(dǎo)率高達(dá)60.2%;分化培養(yǎng)基中添加0.5 mg·L-1的GA3后不定芽的誘導(dǎo)率最高為74%;生根培養(yǎng)基中添加0.5 mg·L-1的IBA時(shí)生根率最高,平均生根數(shù)最多。(剩余15675字)
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西瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
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