沙蔥螢葉甲GdHsp70-2 GdHsp70-3的克隆鑒定與表達譜分析
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摘要:為明確沙蔥螢葉甲Galeruca daurica熱激蛋白70 (Heat shock protein 70,Hsp70)基因的序列結(jié)構(gòu)及其系統(tǒng)進化關(guān)系,本研究通過PCR技術(shù)克隆沙蔥螢葉甲Hsp70基因cDNA全長序列與基因組序列,并進行生物信息學(xué)與表達譜分析。結(jié)果顯示,克隆獲得了沙蔥螢葉甲2條Hsp70基因GdHsp70-2(GenBank登錄號:MZ853083)和GdHsp70-3(Genbank登錄號:OK585088),基因全長分別為2 410 bp和2 242 bp,各自編碼657和646個氨基酸,均含有3個保守的HSP70家族特征序列,預(yù)測蛋白三維結(jié)構(gòu)均由N-端ATPase功能域和C-端底物結(jié)合功能域所組成;系統(tǒng)發(fā)育分析表明GdHSP70-2,GdHSP70-3分別與松墨天牛(Monochamus alternatus)MaltHSC70-1、玉米根螢葉甲(Diabrotica virgifera virgifera) DvirHSP70-2的親緣關(guān)系最近;基因組DNA克隆獲得GdHsp70-2的兩段內(nèi)含子序列,GdHsp70-3則不含有內(nèi)含子;表達譜分析結(jié)果表明GdHsp70-2,GdHsp70-3均在蛹期的表達量最高,在成蟲中分別在翅和足的表達量最高。(剩余19647字)