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產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌Lm4b_02325/26雙基因缺失株構(gòu)建及部分生物學(xué)特性試驗(yàn)

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摘 要:旨在構(gòu)建食源性產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌毒力島4(LIPI-4)中的抗轉(zhuǎn)錄終止子(Lm4b_02325)和未知蛋白(Lm4b_02326)基因的雙缺失株,研究Lm4b_02325/26基因?qū)Ξa(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌(Listeria monocytogenes,LM)的部分生物學(xué)特性的影響。利用同源重組技術(shù)構(gòu)建LM928ΔLm4b_02325/26雙缺失株,測(cè)定LM928和LM928ΔLm4b_02325/26雙缺失株在腦心浸出液肉湯(brain heart infusion broth,BHI)、不同EtOH濃度、不同NaCl濃度、不同pH、不同溫度下的D600nm,繪制生長(zhǎng)曲線;RT-qPCR檢測(cè)雙基因缺失前后體外BHI培養(yǎng)環(huán)境下部分毒力因子轉(zhuǎn)錄水平;平板計(jì)數(shù)測(cè)定其對(duì)鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的黏附、侵襲與胞內(nèi)增殖情況;感染C57BL/6小鼠后檢測(cè)肝、脾、腦組織中的細(xì)菌數(shù)量。(剩余15702字)

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