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紫穗槐抗壞血酸過氧化物酶(APX2)基因的克隆及抗旱性功能驗證

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摘要:為了研究紫穗槐(Amorpha fruticosa L.)在干旱條件下感知脅迫信號并通過生理和生化調(diào)節(jié)途徑來維持其耐性功能作用的基因,可為紫穗槐抗旱性育種提供一個候選基因。通過對紫穗槐在干旱脅迫下的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進行分析,活性氧平衡系統(tǒng)的抗壞血酸過氧化物酶(Ascorbate Peroxidase,APX2)基因的表達量隨脅迫時間顯著升高,對紫穗槐的AfAPX2基因進行克隆,采用無縫克隆技術(shù)連接入門載體(pQB-V3),通過Gateway體系LR反應(yīng)將目的基因構(gòu)建到表達載體,并用電擊法轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌EHA105,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化煙草(Nicotiana tabacum),愈傷組織培養(yǎng)成T0代苗,收獲種子后種植研究其與干旱脅迫的相關(guān)性。(剩余15736字)

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