煙草番茄斑萎病毒RT-LAMP 檢測(cè)體系的建立及優(yōu)化

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摘要：為快速檢測(cè)煙草番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt virus，TSWV），基于TSWV核外殼蛋白（nucleocapsidprotein，NP）保守序列設(shè)計(jì)5組引物進(jìn)行篩選，采用單一變量法對(duì)反應(yīng)溫度、時(shí)間及反應(yīng)體系中dNTPs、Mg2+、甜菜堿的含量和內(nèi)外引物比等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，建立煙草TSWV反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（loop-mediated isothermalamplification，RT-LAMP）檢測(cè)體系，并采用RT-PCR（revers transcription-polymerase chain reaction）檢測(cè)方法進(jìn)行平行比對(duì)試驗(yàn)，驗(yàn)證優(yōu)化后RT-LAMP的特異性、靈敏性及實(shí)用性。（剩余588字）