EIF4A3 shRNA 慢病毒載體的構(gòu)建及其穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系的建立

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［摘 要］ 目的：構(gòu)建真核細胞翻譯起始因子4A3（EIF4A3） -短發(fā)夾RNA（shRNA） 慢病毒載體，建立Neuro-2a-EIF4A3-shRNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系。方法：通過美國國家生物技術(shù)信息中心 （NCBI） 數(shù)據(jù)庫檢索EIF4A3 基因序列，設(shè)計并合成PCR 鑒定引物，并將其連接至經(jīng)EcoR Ⅰ和Age Ⅰ酶切的慢病毒GV493 載體， 構(gòu)建GV493-EIF4A3-shRNA 慢病毒質(zhì)粒， PCR 篩選陽性克隆并測序鑒定。（剩余13531字）