基于PINK1/Parkin通路探討丹紅注射液對(duì)冠心病大鼠心肌線粒體損傷的保護(hù)作用及機(jī)制

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摘要 目的：探討丹紅注射液（DHI）對(duì)冠心?。–HD）大鼠心肌線粒體的保護(hù)作用，以及其對(duì)同源性磷酸酶張力蛋白誘導(dǎo)激酶1（PINK1）/E3泛素連接酶（Parkin）信號(hào)通路的調(diào)控機(jī)制。方法：采用高脂飼料、自由飲水持續(xù)喂養(yǎng)大鼠8周構(gòu)建大鼠CHD模型，以丹紅注射液低（DHI-L）、丹紅注射液高（DHI-H）劑量進(jìn)行干預(yù)，以過表達(dá)PINK1的pcDNA3.1-PINK1（pc）進(jìn)行功能挽救實(shí)驗(yàn)；電鏡檢測(cè)各組大鼠心肌組織中完整線粒體的比例；脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記試劑盒（TUNEL）檢測(cè)大鼠心肌組織的細(xì)胞凋亡；超氧化物陰離子二氫乙啶（DHE）檢測(cè)大鼠心肌組織中活性氧（ROS）的含量；實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）儀檢測(cè)各組大鼠心肌組織中PINK1、Parkin、線粒體融合蛋白2（MNF2）、線粒體分裂基因動(dòng)態(tài)相關(guān)蛋白1（DRP1）、B細(xì)胞淋巴瘤-2相互作用蛋白1（Beclin1）、自噬相關(guān)基因5（ATG5），微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（LC-3）的mRNA表達(dá)；蛋白免疫印跡法（Western Blot）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠心肌組織中PINK1、Parkin、B淋巴細(xì)胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相關(guān)X蛋白（Bax）表達(dá)。（剩余19490字）