轉(zhuǎn)移性宮頸癌細(xì)胞衍生的外泌體miR-21-5p促進(jìn)宮頸癌侵襲及轉(zhuǎn)移
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【摘要】 目的 探討轉(zhuǎn)移性宮頸癌組織的旁分泌作用對腫瘤細(xì)胞擴散的影響。方法 選擇22例轉(zhuǎn)移性宮頸鱗癌患者的手術(shù)標(biāo)本(癌組織和癌旁組織)和血清標(biāo)本,以及22名健康體檢者的血清標(biāo)本,采用逆轉(zhuǎn)錄-實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測miR-21-5p在癌組織和癌旁組織中的表達(dá)水平;分別轉(zhuǎn)染miR-21-5p模擬物/抑制劑到宮頸癌SiHa細(xì)胞,采用RT-qPCR、細(xì)胞集落形成實驗、Transwell遷移實驗、噻唑藍(lán)(MTT)比色法、蛋白免疫印跡法、雙熒光素酶報告分析差異;采用高速離心法提取血清外泌體;采用納米顆粒跟蹤分析(NTA)技術(shù)、蛋白免疫印跡法、透射電子顯微鏡(TEM)對外泌體進(jìn)行表征鑒定;采用RT-qPCR 檢測宮頸鱗癌患者和健康體檢者血清外泌體中miR-21-5p的表達(dá)差異;采用受試者操作特征(ROC)曲線分析血清外泌體中miR-21-5p對腫瘤轉(zhuǎn)移的診斷效能。(剩余13290字)