嗜熱光合酸桿菌Fenna-Matthews-Olson蛋白的分離、純化與結晶
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文章編號:1671-3559(2023)06-0766-08DOI:10.13349/j.cnki.jdxbn.20230403.002
摘要: 為了獲得可用于X射線衍射分析的嗜熱光合酸桿菌(Chloracidobacterium thermophilum,C.thermophilum)Fenna-Matthews-Olson (FMO)蛋白晶體,進一步探究FMO蛋白結構和功能,依次采用高濃度碳酸鈉溶液浸泡、蔗糖密度梯度離心和二乙基氨基乙基葡聚糖凝膠陰離子交換層析方法,直接從嗜熱光合酸桿菌中分離、純化FMO蛋白;利用凝膠過濾層析及十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳,對該蛋白的均一性和純度進行檢測;分別使用坐滴法和懸滴法對蛋白結晶條件進行篩選和優(yōu)化,并對優(yōu)化的蛋白晶體進行X射線衍射分析。(剩余14065字)