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microRNA-223-3p靶向微管相關(guān)蛋白1B抑制肝星狀細(xì)胞活化的機(jī)制研究

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摘要: 目的 探討microRNA-223-3p (miR-223-3p)對肝星狀細(xì)胞活化的影響及機(jī)制。方法 選取人肝星狀細(xì)胞系LX2細(xì)胞為研究對象,采用TGF-β刺激LX2細(xì)胞的方式構(gòu)建肝星狀細(xì)胞活化模型,通過實(shí)時熒光定量PCR檢測miR-223-3p在肝星狀細(xì)胞活化過程中表達(dá)水平變化;轉(zhuǎn)染miR-223-3p mimic至LX2細(xì)胞,通過實(shí)時熒光定量PCR、蛋白免疫印跡法(Western Blot)及細(xì)胞免疫熒光明確miR-223-3p對肝星狀細(xì)胞活化的調(diào)控作用;通過雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-223-3p與靶基因MAP1B的關(guān)系;轉(zhuǎn)染MAP1B的siRNA至LX2細(xì)胞,通過Western Blot明確抑制MAP1B表達(dá)對肝星狀細(xì)胞活化的影響;轉(zhuǎn)染miR-223-3p至LX2細(xì)胞,通過實(shí)時熒光定量PCR和Western Blot驗(yàn)證miR-223-3p對MAP1B的調(diào)控作用。(剩余12221字)

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